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颗粒细胞剥离液

颗粒细胞剥离液

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预期用途:

卵母细胞浆内单精子注射(ICSI)之前,需要从卵母细胞中除去卵丘和颗粒细胞,使得卵母细胞透明带表面暴露,以便微型工具容易进行夹持和注射处理。颗粒细胞剥离可以水解将卵丘细胞和颗粒细胞粘连在一起的透明质酸,用比卵母细胞直径略大的细孔移液管吹打细胞团,有助于卵丘细胞和颗粒细胞细胞的脱落。

使用方法:

卵母细胞-卵丘复合物(OCCs)置于一滴用石蜡培养油覆盖的颗粒细胞剥离液100-150 μL,如果在组织培养皿中需要100-200μL颗粒细胞剥离液30 45 秒后,用细孔玻璃移液管吹打OCCs,使弱化的颗粒细胞团松开,获得带有放射冠的卵母细胞。然后将卵母细胞转移至含有 100-150 μL 含人血清白蛋白HSA5 mg/mL)的 HEPES 培养基液滴中,并使用窄口玻璃移液管轻轻吹打以除去冠状放射细胞。(注意:用于从颗粒细胞团中剥离卵母细胞的移液管内径应在 250 300 μm 之间。用于去除内层放射冠细胞的移液管内径应在135-150 μm 之间。)然后再用一系列(4-5个)100-150 μL 含有HSA5 mg/mL)的 HEPES 培养基液滴进一步洗涤卵母细胞,以除去过量的透明质酸酶和已分离的卵丘细胞。此时,卵母细胞即可以进行ICSI操作。