99499威尼斯-www.9949.com(中国)有限公司-Green App Store

 
99499www威尼斯
Product Center
玻璃化冷冻液套装

玻璃化冷冻液套装

0.00
0.00
产品编号:
注册证编号:
  
预期用途

本产品已在美国专利商标局(USPTO)注册,专为玻璃化冷冻而设计,用于人类辅助生殖技术中冷冻卵母细胞、不同阶段的胚胎和生殖组织(卵巢和睾丸)。

使用方法23-27

1.将平衡液(ES)和冷冻液(VS)从2-4℃的冰箱中取出,平衡至室温(23-27℃)。

2.准备好液氮容器并确保内部的液氮有足够的深度来浸没冷冻支架,放置于显微镜附近。

3.将患者必要的信息标记在每个无菌冷冻解冻板或者培养皿(falcon 3002)和iVitri®-straw-EZ载杆上。

4.在无菌操作下,取两滴ES溶液(每滴50-100μL)分别置于冷冻解冻板或者培养皿的上半部分(如图1所示),分别记为ES1ES2 


5.将卵母细胞或者胚胎转置于ES16分钟,移动卵母细胞或者胚胎一次,然后将细胞在ES2中再平衡6分钟,不可扰动。(注意:卵母细胞或胚胎会收缩,然后逐渐恢复到原始大小,表明平衡完成。对于母细胞,可根据需要将ES 稀释成不同的浓度。

6.在上述ES平衡期间,无菌条件下取两滴VS溶液(50-100μL)分别置于冷冻解冻板或者同一培养皿的下半部分(图1所示),记为VS1VS2

7.将卵母细胞和胚胎以最小体积的液滴从ES2转移至VS1中静置30秒,然后再置于VS230秒。

8.iVitri®-straw-EZ载杆放在显微镜下(iVitri®标志朝上),然后调整焦点于顶部的黑色标记处,再把卵母细胞或胚胎(13个)置于黑色标记附近,同时去除过量的冷冻液,使所含冷冻液体积保持最小(0.2μL)(图2),黑色标记使加载杆套更容易。


9.握住IVitri®手柄端,将iVitri®-straw或者-EZ载杆迅速地插入到新鲜的液氮中(图2)。

10.用长镊子(非手术钳)夹住载杆套,将其插入液氮中直到停止起气泡后,盖入载杆并轻轻拧紧,注意不要将iVitri®-straw-EZ载杆从液氮中取出。

11.iVitri®-straw或者-EZ载杆放在冷冻支架中,使其载杆套端朝下并储存在液氮中。

 补充说明

若冷冻卵母细胞时,需提前将卵子置于HEPES(含12mg/mL rHSA)和ES1:1)混合液滴中平衡4分钟。